5×蛋白上樣緩沖液（配β-巰基乙醇）

產(chǎn)品組成

產(chǎn)品簡介：
本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS，β-巰基乙醇，溴酚藍(lán)，緩沖鹽溶液等。
SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)－SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷，這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷*被SDS掩蓋，消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異，SDS還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵，破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)，β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)，消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。zui終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白（亞單位），電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑，可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。

保存時(shí)間：

未混合前2-8℃可保存一年，混合后保存三個(gè)月。

使用說明：

1．  根據(jù)用量，以每1ml的5×蛋白上樣緩沖液加入50ulβ-巰基乙醇，混勻。此即為配好的蛋白上樣緩沖液。此配好的蛋白上樣緩沖液在2-8℃保存三個(gè)月。

2．  請(qǐng)按每40微升蛋白樣品加入10ul配好的上樣緩沖液的比例來使用。如果蛋白濃度過高，可用雙蒸水稀釋。

3．  混勻后，100℃水浴加熱3-5分鐘，使蛋白變性。

4．  冷卻到室溫后，離心數(shù)秒后，混均再離心30秒取上清直接上樣即可。 

注意事項(xiàng)：

β-巰基乙醇味道特別難受，所有操作是在通風(fēng)柜中操作。如果沒有通風(fēng)柜，也盡量找一通風(fēng)處操作，或者使用5×蛋白上樣緩沖液（含DTT）。

8%膠時(shí)溴酚藍(lán)大概在30kd左右， 12%膠時(shí)，約在20kd左右，15%膠時(shí)，大概在10kd。請(qǐng)根據(jù)自己目標(biāo)條帶來判斷結(jié)果電泳時(shí)間。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。