Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒現(xiàn)貨

Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒
          

 本試劑盒自訂購(gòu)之日起一年內(nèi)有效。本試劑盒用于酶標(biāo)板或者200ul比色皿時(shí)可做1000孔。當(dāng)使用2ml比色皿時(shí)可做100孔，如果是1ml比色皿時(shí)可做200孔。 

Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒現(xiàn)貨

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Folin-酚試劑法包括兩步反應(yīng)：*步是在堿性條件下，蛋白質(zhì)與銅作用生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物；第二步是此絡(luò)合物將Folin試劑還原，產(chǎn)生深藍(lán)色，顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。定量范圍為5～100μg/ml蛋白質(zhì)。Folin試劑顯色反應(yīng)由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外，不同蛋白質(zhì)因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強(qiáng)度稍有不同。

使用說(shuō)明

一，酶標(biāo)儀法

1.         根據(jù)需要量，將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50：1混合，其有效期為24小時(shí)，過(guò)期失效。

2.         稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取10微升BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至100微升（標(biāo)準(zhǔn)品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4，6，8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加PBS補(bǔ)足到20微升。

3.         將樣品作適當(dāng)稀釋（多做幾個(gè)梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋），加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時(shí)的誤差，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確，所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。

4.         將配好的Folin酚甲試劑每孔加入200微升，輕輕震動(dòng)，混勻，室溫放置10分鐘。

5.         各孔加入20微升Folin酚乙試劑，迅速混勻，37℃放置30分鐘。用酶標(biāo)儀測(cè)定A650，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。

6.         使用溫箱孵育時(shí)，應(yīng)注意防止因水粉蒸發(fā)影響檢測(cè)結(jié)果。

二，分光光度計(jì)法

如沒(méi)有酶標(biāo)儀，可用分光光度計(jì)在離心管中混勻后加入比色皿中比色。步驟如下：

1．  根據(jù)需要量，將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50：1混合，其有效期為24小時(shí)，過(guò)期失效。

2．  稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取10微升BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至100微升（標(biāo)準(zhǔn)品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。

3．  取八支（或者更多）5ml離心管，標(biāo)讓號(hào)，按下表加入試劑。

4．混勻，37℃放置30分鐘。用分光光度計(jì)測(cè)定A650.